Ames TEST(艾姆氏測試法、安姆氏測試法、安氏測試法)
這是一個重要的發明,透過這樣的檢驗方式,我們可以得知被檢測的物質是否會引起基因突變或致癌?
圖一:發明ames test 的 美國柏克萊加州大學教授艾姆斯(B.N.Ames)目前這位博士依然建在。
原理:組氨酸缺陷型試驗菌株本身不能合成組氨酸,只能在補充組氨酸的培養基上生長,而在缺乏組氨酸的培養基上,則不能生長。
如果加入受測物質後...沙門氏桿菌還會繼續生長的話?就表示該物質有引起基因突變的可能性非常大,會被判定不安全,可能不能上市販賣....
如果是安全的就會呈現出左邊的培養皿中的樣子
如果發生了突變...就會以右邊的方式呈現....(通常突變的量大約要超過一倍以上,才會被判定為有疑慮),突變後的數量會以菌株的種類不同而有不同的評定標準。
所謂的S9萃取物,是要另外提煉製作(製作方法下)
大鼠肝微粒體酶的誘導和S9 的製備
誘導
最廣泛應用的大鼠肝微粒體酶的誘導劑是多氯聯苯(PCB 混合物),選擇健康雄性大鼠體重200g 左右,一次腹腔注射誘導劑,劑量為500mg/kg 體重。
誘導劑溶於玉米油中,濃度為200mg/mL。
動物經多氯聯苯誘導後第五日斷頭處死,處死前12h 停止飲食,但可自由飲水。
苯巴比妥鈉和β-萘黃酮結合也可做為誘導劑,健康雄性大鼠體重200g 左右,經口或腹腔注射80mg/kg 苯巴比妥鈉和80mg/kgβ-萘黃酮,連續3 天。
處死前16h 停止飲食,但可自由飲水。
由於化學物質經腹腔注射,容易引起肝臟形成外皮,不易剝離,推薦使用經口灌胃的方式。
製備
首先,用75%酒精消毒動物皮毛,剖開腹部。
在無菌條件下,取出肝臟,去除肝臟的結締組織,用冰浴的0.15mol/L 氯化鉀溶液淋洗肝臟,放入盛有0.15mol/L 氯化鉀溶液的燒杯裏。
按每克肝臟加入0.15mol/L 氯化鉀溶液3mL。用電動勻漿器製成肝勻漿,再在低溫高速離心機上,在4℃條件下,以9000g 離心10min,取其上清液(S9)分裝於塑膠管中。
每管裝2 mL ~3 mL。
儲存於液氮生物容器中或-80℃冰箱中備用。
上述全部操作均在冰水浴中和無菌條件下進行。
製備肝S9 所用一切手術器械、器皿等,均經滅菌消毒。
S9 製備後,其活力需經診斷性誘變劑進行鑒定。
用Ames Test 來偵測出致癌物質的試驗,只須幾天時間,費用亦只要些許。目前此法已廣泛為世界各國所採用,作為測試各種有害或毒性污染物致突變性的參考方法。
不論是什麼樣的東西,大致上在上市之前都必須作該項檢測,以確保使用安全安心。
目前全世界各國都有關的規定,連台灣也不例外。

謝謝學長的分享,介紹很清楚喔! [版主回覆09/10/2008 12:41:45]
原本我不知道你是誰?
是有人跟我說我才知道
這篇是當初你家老闆來上課時,我抽籤抽到的題目...
這是很重要的一項實驗喔
呵呵,我們家老闆都用一樣的教材,所以不能偷用學長的去呼嚨啦
[版主回覆09/10/2008 18:32:13]可以偷啦
妳家老闆的記憶力沒那麼好
把內容稍為改一下就好了啊
感謝您 好詳細喔~~~
[版主回覆12/10/2008 22:18:36]皮毛啦
我也沒做過這實驗
不過這個實驗室非常重要的科學基礎
也是人類的福祉
博主,请问制备S9的第二种方法,苯巴比妥和萘黄酮分别溶于何种溶剂中呢?制备好的S9其活力需要诊断性诱变剂进行鉴定,能给出一个具体的诱变剂名字吗?达到何种标准算是其活力满足要求呢?我一直在做Ames试验,但是S9都是从国外买的,我们希望能在实验室自己制备,盼告知,谢谢!
[版主回覆02/15/2009 23:14:30]很抱歉
我的專長不在此
但我是參考
中華人民共和國所頒佈的
" 化妆品卫生规范 Hygienic Standard for Cosmetics" 第二部分 毒理学试验方法
八、鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验………………………………………………………………118
你可以參考一下喔
你好
想請文您相關資訊是從何得知的呢
有沒有文獻資料呢?
謝謝你喔講的好詳細
[版主回覆04/14/2010 16:12:00]課本, 期刊, 論文, 網路, 還有相關的世界各國化妝品法規
都是我參考的資料...
你可以參考中國大陸的衛生法規比較方便也比較容易取得
前幾天上毒物學
提到安姆氏試驗
因老師在趕課
課本說明又太簡略
害我有聽有看卻沒有懂
您這篇文章對我的幫助實在太大了
實在很敬佩也很感謝您願意如此用心分享
[版主回覆04/01/2011 12:15:22]不客氣啦~
我也是賣弄皮毛而已...